靈芝多糖
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靈芝多糖（Ganoderma lucidum Polysaccharide）目前已分離到的有200多種，其中大部分為β –葡聚糖，少數(shù)為α –葡聚糖，多糖鏈由三股單糖鏈構(gòu)成，是一種螺旋狀立體構(gòu)形物，其立體構(gòu)形和DNA、RNA相似，螺旋層之間主要以氫鍵固定，分子量從數(shù)百到數(shù)十萬，除一小部分小分子多糖外，大多不溶于高濃度酒精，在熱水中溶解，大多存在于靈芝細(xì)胞內(nèi)壁。靈芝多糖大多為異多糖，即除含有葡萄糖外，大多還含有少量阿拉伯糖、木糖、巖藻糖、鼠李糖、半乳糖等其他單糖。 靈芝多糖在國外亦在進(jìn)行廣泛、深入研究。
[靈芝多糖的醫(yī)療保健價(jià)值]
靈芝多糖是靈芝中最有效的成分之一，因此，也特別受到醫(yī)藥科技工作者的重視，研究報(bào)道也最多。現(xiàn)知靈芝多糖有廣泛的藥理活性，能提高機(jī)體免疫力，提高機(jī)體耐缺氧能力，消除自由基，抑制腫瘤、抗輻射，提高肝臟、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白質(zhì)能力，延長壽命，靈芝多糖還具有刺激宿主非特異性抗性、免疫特異反應(yīng)以及抑制移植腫瘤生理活性的特性。多糖分子量大于1×104時(shí)顯示強(qiáng)抑制腫瘤活性，活性強(qiáng)弱還與多糖鏈分叉的程度及支鏈上羥基的數(shù)量有關(guān)。對(duì)心血管疾病、氣喘、過敏、神經(jīng)衰弱、胃熱等有顯著效果，同時(shí)還具有降血壓、降血脂、解血瘀、改善血液循環(huán)、皮膚美容等作用。靈芝的多種藥理活性大多和靈芝多糖有關(guān)。
[靈芝多糖抑制腫瘤3種手段]：
1.通過提高機(jī)體免疫力，使免疫細(xì)胞能在腫瘤發(fā)生早期把其殺死、吞噬；
2.提高血小板纖維蛋白的形成能力，大量的纖維蛋白能將早期的腫瘤腫塊緊緊包裹，使它與外界隔絕，杜絕腫瘤的營養(yǎng)，從而使它長期處在休眠潛伏狀態(tài)；
3.降低腫瘤細(xì)胞表面電荷，腫瘤細(xì)胞表面電荷要比正常細(xì)胞高好幾倍，表面電荷的降低，腫瘤細(xì)胞的分裂調(diào)節(jié)基因就能啟動(dòng)，從而可抑制腫瘤的無限、快速分裂能力．目前，靈芝多糖已被用作治療腫瘤的藥物之一?！ ?/p>
靈芝多糖的提取方法
一、靈芝菌絲體多糖的提取
（一）材料
1.菌種：湖南省食用菌研究所提供的韓國靈芝母種。
2.種子培養(yǎng)基：玉米粉2％ 大米粉2％
硫酸鎂0.05％ ph值自然
3.發(fā)酵培養(yǎng)基：麥麩浸出液10％ 葡萄糖2％
硫酸銨0.2％
磷酸二氫鉀0.2％ ph值自然
（二）方法
1.種子培養(yǎng)：
2.發(fā)酵培養(yǎng)生產(chǎn)菌絲體。
3.測定干、濕菌絲體。
將發(fā)酵液進(jìn)行離心，然后取其沉淀物，加人60％蔗糖，進(jìn)行高速（3000轉(zhuǎn)／分）密度梯度離心5分鐘，取上層菌絲體，洗凈蔗糖再壓干，即得濕菌體，然后再將濕菌體于高溫下烘干即為干菌體。分別稱取其重量。
4.多糖的提取。
菌絲體預(yù)處理。取適量的靈芝濕菌體，用乙醇等有機(jī)溶劑進(jìn)行處理，以除去濕菌體中的脂類物質(zhì)，同時(shí)使糖苷酶失去活性，防止多糖的降解。
（2）用熱水提取多糖。取上面經(jīng)預(yù)處理的靈芝濕菌體，放人1：20的熱水（95℃）中浸提，一次小時(shí)，連續(xù)浸提3次，合并3次的水浸提液減壓、濃縮至一定體積，再用3倍體積的95％乙醇混合，靜置10-12小時(shí)，再離心，最后加入75％的乙醇反復(fù)洗滌，以沉淀多糖。此沉淀物為粗多糖，其中混雜有蛋白質(zhì)、色素、低聚糖等小分子雜質(zhì)，一般要經(jīng)過純化。
（3）多糖的純化，去蛋白質(zhì)和deae纖維素柱層析。去蛋白質(zhì)一般采用sevag法：加入0.2倍多糖溶液體積的氯仿和0.04倍體積的正丁醇混合振蕩半小時(shí)進(jìn)行分離，直至氯仿與水的界面無沉淀為止，且要重復(fù)處理2-3次才能有效除去多糖中的蛋白質(zhì)。多糖純化一般采用硼酸型deae纖維素柱層析法：取脫蛋白后的多糖，分別以0.025mol／l、0.1mol/l的硼砂，0.1mol/l的氫氧化鈉溶液進(jìn)行洗脫，然后用0.2％恿銅硫酸液比色測定吸收度，收集有多糖的洗脫液，再濃縮脫鹽即得所需的多糖。
（4）多糖純度的鑒定。
可用電泳法進(jìn)行鑒定，如果存在單一帶，說明為純多糖。
5.多糖與多糖中蛋白質(zhì)含量的測定：
取一定量菌絲體粗多糖，加水煮沸溶解，用sevag方法脫去蛋白考馬斯亮蘭法測其粗多糖中蛋白質(zhì)和多糖的含量。測得菌絲體中粗多糖含17.01％、多糖含5.43％、蛋白質(zhì)含量2.16％?！ ?/p>
靈芝子實(shí)體多糖的提取
（一）材料
1.菌種：韓國靈芝栽培種。
2.子實(shí)體栽培生產(chǎn)料：木屑78％，米糠20％，蔗糖1％，
石膏1％，ph值自然。
（二）方法
1.子實(shí)體栽培。
2.靈芝子實(shí)體預(yù)處理。
3.子實(shí)體多糖的提取。
取適量的靈芝子實(shí)體，搗碎成粉末，用80目篩過篩，然后用熱水提取法進(jìn)行提取。具體操作同菌絲體多糖的提取。提取出的粗多糖含有色素、蛋白質(zhì)等小分子雜質(zhì)，也須除去。
4.去除蛋白質(zhì)和色素。
子實(shí)體粗多糖去除蛋白質(zhì)也采用se陰法。去除色素，目前尚未發(fā)現(xiàn)很理想的方法。一般用乙醇進(jìn)行反復(fù)沖洗，但效果不很理想。
5.多糖純度的鑒定。
同菌絲體多糖純度的鑒定。
6.子實(shí)體粗多糖、多糖及蛋白質(zhì)含量的測定。
具體方法同菌絲體多糖及蛋白質(zhì)含量的測定。測得子實(shí)體中粗多糖7.5％、多糖1.5％，蛋白質(zhì)0.6％，其含量均低于菌絲體中的含量。可見菌絲體階段就形成了靈芝多糖的有效成分，為靈芝液體深層發(fā)酵生產(chǎn)菌絲體提供了科學(xué)依據(jù)。
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