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柱色譜法

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柱色譜法又稱柱層析。固定相裝于柱內(nèi),流動(dòng)相為液體,樣品沿豎直方向由上而下移動(dòng)而達(dá)到分離的色譜法。它既區(qū)別于用于分離分析的GC和HPLC法,也區(qū)別于樣品在平面形固定相內(nèi)移動(dòng)的紙層析和薄層色譜法。本法主要用于分離,有時(shí)也起到濃縮富集作用。在環(huán)境分析測(cè)試中,本法廣泛用于樣品的前處理,如在水和氣溶膠的有機(jī)污染分析中,將萃取液轉(zhuǎn)移到層析柱內(nèi),而后用環(huán)己烷洗脫烷烴部分,用苯洗脫多環(huán)芳烴類污染物,用乙醇洗脫極性組分;在土壤分析中,用氧化鋁柱捕集分離稀土元素釷、鉈等。

吸附柱色譜通常在玻璃管中填入表面積很大經(jīng)過(guò)活化的多孔性或粉狀固體吸附劑。當(dāng)待分離的混合物溶液流過(guò)吸附柱時(shí),各種成分同時(shí)被吸附在柱的上端。當(dāng)洗脫劑流下時(shí),由于不同化合物吸附能力不同,往下洗脫的速度也不同,于是形成了不同層次,即溶質(zhì)在柱中自上而下按對(duì)吸附劑的親和力大小分別形成若干色帶,再用溶劑洗脫時(shí),已經(jīng)分開的溶質(zhì)可以從柱上分別洗出收集;或?qū)⒅?,擠出后按色帶分割開,再用溶劑將各色帶中的溶質(zhì)萃取出來(lái)。

柱色譜法column chromatography 將色譜填料裝填在色譜柱管內(nèi)作固定相的色譜方法。根據(jù)色譜柱的尺寸、結(jié)構(gòu)和制作方法的不同,又可分為填充柱色譜和毛細(xì)管柱色譜。

本實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵是:裝柱要緊密,要求無(wú)斷層、無(wú)縫隙;在裝柱、洗脫過(guò)程中,始終保持有溶劑覆蓋吸附劑;一個(gè)色帶與另一色帶的洗脫液的接受不要交叉。

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