醫(yī)院藥學(xué)/中草藥化學(xué)成分一般鑒別方法
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(1)加熱或礦酸試驗(yàn):取檢品的水溶液1ml于試管中,加熱至沸或加5%鹽酸,如發(fā)生混濁或有沉淀示含有水溶性蛋白質(zhì)。
(2)縮二脲試驗(yàn):取檢品的水溶液1ml,加10%氧化鈉溶液2滴,充分搖勻,逐漸加入硫酸銅試液,隨加搖勻,注意觀察,如呈現(xiàn)紫色或紫紅色示可能含有蛋白質(zhì)和氨基酸。
凡蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中含有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵(-CONH-)者均有此反應(yīng),能在堿性溶液中與Cu2+生成仙絡(luò)合物,呈現(xiàn)一系列的顏色反應(yīng),二肽呈藍(lán)色,三肽呈紫色,加肽以上呈紅色,肽鍵越多顏色越紅。
(3)茚三酮試驗(yàn),取檢品的水溶液1ml,加入茚三酮試液2-3滴,加熱煮沸4-5分鐘,待其冷卻,呈現(xiàn)紅色棕色或藍(lán)紫色(蛋白質(zhì)、胨類、肽類及氨基酸)。
α氨基酸與茚三酮的水合作物作用,氨其酸氧化成醛、氨和二氧化碳,而茚三酮被還原成仲醇,與所后成的氨及另一分子茚三酮縮合生成有藍(lán)紫色的化合物。
【注】①茚三酮試劑主要是多肽和氨基酸的顯色劑,反應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。試劑溶液pH值以5-7為宜,必要時(shí)可加吡啶數(shù)滴或醋酸鈉調(diào)整。
②此反應(yīng)非常靈敏,但有個(gè)別氨基酸不能呈紫色,而呈黃色,如脯氨酸。
(4)氨基酸薄層層析檢出反應(yīng):
②展開劑:(1)正丁醇:水(1:1)(2)正丁醇:醋酸:水(4:1:5)
③顯色劑:0.5%茚三酮丙酮溶液,噴霧后于1100烘箱放置5分鐘,顯藍(lán)紫允或紫色。
2.皂甙
(1)泡沫試驗(yàn):取檢品的水溶液2ml于帶塞試管中,用力振搖3分鐘,即產(chǎn)生持久性蜂窩狀泡沫(維持10分鐘以上),且泡沫量不少于液體體積的1/3。
【注】常用的增溶劑吐溫、司盤,振搖時(shí)均能產(chǎn)生持久性泡沫,要注意區(qū)別。
(2)溶血試驗(yàn):取試管4支,分別加入濾液0.25、0.5、0.75 ml,然后依次分別加入生理鹽水2.25、2.0、1.75、1.5 ml,使每一個(gè)試管中的溶液都成為2.5ml, 再將各試管加入2%的血細(xì)胞懸液2.5ml,振搖均勻后,同置于370水浴或25-270的室溫中注意觀察溶血情況,一般觀察3小時(shí)即可,或先滴紅細(xì)胞于顯微鏡下,然后滴加檢液看血細(xì)胞是否消失。如有溶血現(xiàn)象示正反應(yīng)。
【注】①鞣質(zhì)對血紅細(xì)胞有凝集作用,干擾溶血試驗(yàn)的觀察,應(yīng)事先除去(可用取勝酰胺粉吸附或用明膠沉淀)。
②檢液應(yīng)為中性溶液。
(3)醋酐濃硫酸試驗(yàn)(Liebrmann Burchard反應(yīng))取檢品的水溶液置蒸發(fā)皿中,于水浴上蒸干,殘?jiān)尤肷倭?a href="/w/%E5%86%B0%E9%86%8B%E9%85%B8" title="冰醋酸" class="mw-redirect">冰醋酸使溶解,再加入醋酐濃硫酸(19:1)試液,呈現(xiàn)紅紫色并變成污色綠色(甾類、三萜類成分或皂甙)
(4)區(qū)別甾體皂甙和三萜皂甙:取帶塞試管兩支,各盛檢品的水溶解1 ml,1支加0.1N鹽酸溶液2ml,另一支加0.1N氫氧化鈉溶液2ml用力振搖1分鐘(需左右手交替振搖各半分鐘),觀察兩管泡沫的多少,若兩管泡沫體積相同或酸管多,示含三萜式皂甙;若加堿管泡沫多于加酸管示含甾示含甾體皂甙。
三萜皂甙為酸性皂甙在酸性水溶液中形成較穩(wěn)定的泡沫;甾體皂甙為中性皂甙在堿笥溶液中能形成較穩(wěn)定的泡沫。
3.糖、多糖或甙類
(1)堿性酒石酸銅試液:取檢品的水溶液1-2ml(如為醇溶液須將醇蒸發(fā)除去),加入堿笥酒石酸銅試液1ml,于沸水浴上加熱5分鐘,產(chǎn)生棕紅色或磚紅色氧化亞銅沉淀,示有還原糖。
還原糖能使二價(jià)銅鹽(藍(lán)色)還原成氧化亞銅,醛糖的醛基氧化成羧基:
【注】①如檢液呈酸性,應(yīng)先堿化。
②此反應(yīng)所產(chǎn)生的沉淀由于條件不同,其顏色也不同,質(zhì)點(diǎn)上的呈黃色,質(zhì)點(diǎn)大的呈紅色。有保持性膠體存在時(shí),也常產(chǎn)生黃色沉淀。
③職樣品中含有其他醛、酮及還原較強(qiáng)的其他成分,或中劃藥制劑中附加的抗氧劑、;葡萄糖等均可顯陽性反應(yīng)。
(2)α萘酚試驗(yàn)(Molisch紫環(huán)反應(yīng)):取檢品的水溶液1ml,加5%萘酚試液數(shù)滴振搖后,沿管壁滴入5-6滴濃硫酸,使成兩液層,待2-3分鐘后,兩層液面出現(xiàn)紫紅色環(huán)(糖、多糖或甙類)。
多糖類遇濃硫酸被水解成單糖,單糖被濃硫酸脫水閉環(huán),形成糠醛類化合物,在濃硫酸存在下與α萘酚發(fā)生酚醛縮合反應(yīng),生成紫紅色縮合物。
【注】①甙的分子結(jié)構(gòu)中含有糖基,一般屬于單糖類,如葡萄糖,鼠李糖、半乳糖,但也有含二分子糖(雙糖)或多分子糖(多糖)。在上述反應(yīng)條件下,甙被水解成單糖,因此甙萘酚試驗(yàn),系分子中糖部分的反應(yīng)。
②由于此反應(yīng)較為靈敏,如有微量濾紙纖維或中草藥粉末存在于溶液中,都能產(chǎn)生上述反應(yīng)。故濾過時(shí)應(yīng)加注意。
(3)多糖的確證試驗(yàn):取檢品的水溶液5ml于水 蒸發(fā)至干,加入1ml蒸餾水,再加入乙醇5ml,如出現(xiàn)沉淀,濾過收集后用少量熱乙醇洗滌,再將沉淀物溶于3ml蒸餾水中,做下例試驗(yàn)。
①碘試驗(yàn):取檢品的不溶液1ml,加碘試液1滴,觀察顏色變化,如呈藍(lán)黑色為地衣糖;紫黑色為糊精;藍(lán)色加熱消失,冷后藍(lán)色再現(xiàn)為淀粉。
②多糖水解:取檢品的水溶液1ml,加入稀鹽酸5滴,置沸水浴中加熱10-15分鐘,然后用10%氫氧化鈉液中和至中性,再加新配制的堿性酒石酸銅試淮4滴,另取檢液1ml,不加酸水解直接加入上述試液4滴,兩管同置水浴上煮沸5-6分鐘。如果水解后生成棕紅色常常物的量比未經(jīng)水解的多,則示有多糖。
多糖水解后產(chǎn)生單糖,利用單糖的還原性,使銅離子還原成氧化亞銅。
4.鞣質(zhì)及酚類
(1)三氯化鐵試驗(yàn):取檢品的水溶液1ml,加三氯化鐵試液1-2滴,呈現(xiàn)綠色、污綠色、藍(lán)黑色或暗紫色(可水解鞣質(zhì)顯藍(lán)一藍(lán)黑色,縮合鞣 顯綠色一污綠色)。
鞣質(zhì)均是多羥基酚的衍生物,即多元酚,能和三價(jià)鐵離子發(fā)生顏色反應(yīng)生成復(fù)雜的絡(luò)鹽。
【注】此反應(yīng)如遇有礦酸或有機(jī)酸、醋酸鹽等存在,能阻礙顏色的生成。硝基酚類對三氯化鐵試劑無明顯反應(yīng)。
(2)明膠試驗(yàn):取檢品的水溶液1ml,加氯化鈉明溶液2-3滴,即生成白色沉淀物。
鞣質(zhì)有凝固蛋白的性能。
(3)溴試驗(yàn):取檢品的水溶液1ml,加溴試液1-2滴,生成白色或沉淀物,示可能含有酚或兒茶酚鞣質(zhì)。
【注】過多的溴會阻礙鞣質(zhì)的沉淀,因此溴水不宜多加。
(4)香草醛一酸試驗(yàn):取檢品的水溶液點(diǎn)于濾紙片上,干后,噴霧或滴加香草醛一鹽酸試液,呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)(多元酚類物質(zhì))。
(5)鞣質(zhì)、酚類薄層層析檢出反應(yīng):
①吸附劑:聚酰胺;硅膠;硅膠;石膏:水(5:1:7)調(diào)成狀,涂成薄板,1050烘干45分鐘。
②展開劑:乙醇:醋酸(100:2);正丁醇:乙酸乙酯:水(5:4:1);苯:甲醇(95:5)。
③顯色劑:10%三氯化鐵溶液;1%三氯化鐵乙醇溶液與1%鐵氰化鉀水溶液(1:1)顯藍(lán)一紫色斑點(diǎn)。
5.黃酮及其甙類
(1)鹽酸一鎂(或鋅)粉試驗(yàn):取檢品的乙醇溶液1ml,加放少量鎂粉(或鋅粉),然后加濃鹽酸4-5滴,置沸水浴中加熱2-3分鐘,如出現(xiàn)紅色示有游離黃酮類或黃酮甙(以同法不加鎂或粉做一對照,如兩管都顯紅色則有花色素存在。如繼續(xù)加碳酸試液使成堿笥即變成紫色雙轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色,即證明含花色素)。
黃酮類的乙醇溶液,在鹽酸存在的情況下,能被鎂粉還原,生成花色甙元而呈現(xiàn)紅色或紫色反應(yīng)(個(gè)別為淡黃色、橙色、紫色或藍(lán)色)。這是由于酮類化合物分子中含有一個(gè)堿性氧原子,致能溶于稀酸中被還原成帶四價(jià)的氧原子即鋅鹽。本法是鑒別黃酮類的一個(gè)反應(yīng)。但花色素本身在酸性下(不需加鎂粉)呈紅色,應(yīng)加以區(qū)別。
【注】①此反慶僅在化學(xué)結(jié)構(gòu)中,第三位上帶羥基的酮醇類顯色較明顯,而其它黃酮烷酮類均不甚明顯。因此試驗(yàn)呈陰性反慶是不能做出否定的結(jié)論,尚需結(jié)合其他實(shí)驗(yàn)再做結(jié)論。
②試驗(yàn)應(yīng)在醇中進(jìn)行,水分多會影響顏色的生成。此反慶較慢,有時(shí)需置水浴上加熱,以促使反應(yīng)的進(jìn)行。
(2)熒光試驗(yàn):
①三氯化鋁試驗(yàn):取檢品的乙醇溶液點(diǎn)于濾紙片上(干后再點(diǎn)1次,使其濃度庥中),干后,噴霧1%三氯化鋁乙醇試液,在紫外光燈下觀察,呈現(xiàn)黃色、綠色、橙色等熒光為黃酮類;呈現(xiàn)天藍(lán)色或黃綠色;熒光,則為二氫黃酮類。這是區(qū)別二氫黃酮類化合物的一種鑒別反應(yīng)。
②硼酸丙酮枸櫞酸丙酮試驗(yàn):取檢品的乙醇溶液1ml,在沸水浴上蒸干加入飽和硼酸丙酮溶液及10%枸櫞酸丙酮溶液各0.5ml,蒸去丙酮后,在紫外光燈下觀察,管內(nèi)呈現(xiàn)強(qiáng)烈的綠色熒光(黃酮或其甙類)。
(3)堿液試驗(yàn):取檢品的乙醇溶液點(diǎn)于濾紙片上(干后,再點(diǎn)一次,使其溶液集中),干后,噴1%碳酸鈉溶液或在氨蒸氣中熏幾分鐘,呈現(xiàn)亮黃、綠或橙黃色。如將氨氣熏過的濾紙露置空氣中,顏色逐漸裉去而變?yōu)樵械念伾S酮或其甙類)。
試劑 |
一 |
NH3 |
AICI3 |
Na2CO3 |
|||||
光線 |
ViS. |
U.V |
ViS. |
U.V |
ViS. |
U.V |
ViS. |
U.V |
|
化 合 物 |
黃酮 |
淡黃 |
暗棕、紅棕、黃棕 |
黃 |
亮黃 |
淡黃 |
亮黃 |
||
黃酮醇 |
淡黃 |
亮黃、黃綠、棕 |
黃 |
亮黃、黃綠、綠 |
黃 |
黃、黃棕、暗藍(lán) |
|||
異黃酮 |
無色 |
淡黃、紫 |
無色 |
淡黃、紫 |
無色 |
淡綠 |
|||
兒茶精 |
無色 |
無色 |
無色 |
淡藍(lán)黑 |
無色 |
||||
二氫黃酮 |
無色 |
無色** |
無色 |
無色、淡黃、淡綠 |
無色 |
淡黃、綠 |
|||
花色甙 |
紅、橙紫 |
深紅、橙紫、淡棕 |
藍(lán) |
暗藍(lán) |
|||||
查耳酮 |
黃 |
棕、黑、黃棕 |
黃、橙、紅 |
橙、紅、紫黑 |
黃、橙 |
橙*、棕、紅 |
橙、藍(lán)紅 |
*示有熒光**示在短波紫外線光下為黑色ViS. 系可風(fēng)光U.V系紫外光
6.蒽醌及其甙類 取檢品的乙醇溶液10ml,蒸去乙醇,殘?jiān)?%氫氧化鈉溶液2-3ml,在沸水中加15分鐘,冷后濾過,濾液加稀鹽酸酸化,加乙醚提取,取乙醚提取液做下列檢查:
(1)堿液試驗(yàn):取上述乙醚溶液,加等量1%氫氧化鈉溶液,搖勻,水層呈現(xiàn)紅色,加入少許3%過氧化氫溶液,在沸水浴中加熱4分鐘,紅色不裉,當(dāng)加酸酸化后,紅色消失。加堿堿化后紅色又出現(xiàn)(蒽醌類化合物反應(yīng))。
1,8一二羥基蒽醌的酚羥基遇氫氧化鈉生成鈉鹽,而呈現(xiàn)紅色,遇酸顯黃色。
【注】蒽醌和二蒽酮與堿液不顯紅色,只呈黃色,但以氧化羥基蒽醌后遇堿即顯紅色。
(2)醋酸鎂試驗(yàn):取上述醚溶液1ml,蒸去乙醚,殘?jiān)尤胍掖?ml溶解,加入1%醋酸鎂甲醇溶液3滴,顯紅色(如顯橙黃色可能為二氫蒽醌)。
羥基蒽醌類與醋酸鎂甲醇溶液反應(yīng)可顯橙、紅、藍(lán)、紫等色,產(chǎn)生這些顏色的必要投機(jī)倒把至少有一個(gè)α位羥基。加羥基的位置不同,產(chǎn)生的顏色也不同。一般在同一苯環(huán)上有兩個(gè)α羥基者顯紫紅色或藍(lán)色;如同一苯環(huán)在有兩個(gè)鄰位的羥基,一個(gè)α位,一個(gè)β位,顯紫色或紫鍇。其他α羥基蒽醌一般呈橙至紅色。因此這一顏色反應(yīng)僅可作蒽醌的檢只識用,而且還可初步判斷羥的基的位置。
【注】醋酸鎂試驗(yàn)亦可用濾紙斑點(diǎn)顯色法進(jìn)行。
(3)蒽醌薄微量檢出反應(yīng):
①吸附劑:硅膠;中性氧化鋁(Ⅲ級);硅膠G濕法制板。
②展開劑:苯:醋酸(6:3)石油醚:丙酮:水(5:3:3:5);苯甲酸酯:甲酸(74:24:1)。
③顯色劑;5%氫氧化鈉液(顯紅色);1%醋酸鎂甲醇溶液(顯黃色)。
此外亦可在紫外燈光下觀察熒光。
(1)3,5一二硝基苯甲酸試驗(yàn)(Kedde’s反應(yīng)):取檢品的乙醇溶液2 ml,加3,5一一硝基苯甲酸試液3-4滴再加10%氫氧化鈉溶液2滴,呈現(xiàn)紅色或紫紅色(9為α、β不飽和內(nèi)酯環(huán)強(qiáng)心甙的反應(yīng))。
(2)堿性苦味酸試驗(yàn):取檢品的醇溶液1ml,顯橙色或橙紅色(此反應(yīng)常在15分鐘后,顯色最明顯)。
(3)亞硝酰鐵氰化鈉試驗(yàn)(Legal反應(yīng)):取檢品的醇溶液1ml,蒸去溶劑,放冷后,加吡啶 少許使殘?jiān)芙猓?.5%亞鐵試液4-6滴,搖勻,再加入10%氫氧化鈉1-2滴,即顯紅色并逐漸消失(為檢查強(qiáng)心甙元的反應(yīng))。
(4)三氯化鐵水醋酸試驗(yàn)(Keller反應(yīng)):取檢品的乙醇溶液2ml,蒸去溶劑,殘?jiān)?.5%三氯化鐵冰醋酸溶液1ml,使溶解后,沿試管壁加入濃硫酸1ml,在兩液界面顯紅棕色環(huán),繼則變?yōu)闇\綠、藍(lán)色,而冰醋酸層顯藍(lán)色,示含α去氧糖強(qiáng)心甙。
(5)醋酐一濃硫本試驗(yàn)(Liebirman Barchard 反應(yīng)):取檢品的乙醇溶液2 ml,置蒸發(fā)皿中,于水浴上蒸干,殘?jiān)颖姿?ml使溶解,再加入醋酐一濃硫酸(19:1)數(shù)滴,呈現(xiàn)黃→紅→藍(lán)→紫→污綠色,并逐漸裉色。因顏色變化很快,須注意觀察(為檢查強(qiáng)心甙分子結(jié)構(gòu)中甾體母核的反應(yīng))。
【注】①試驗(yàn)1,2,3,的反應(yīng),均系在較強(qiáng)的堿性條件下進(jìn)行,當(dāng)有蒽醌存在時(shí),須先將檢液置水浴上蒸去乙醇,再加乙醚適量,用1%氫氧化鈉溶液反復(fù)萃除蒽醌(棄去紅色堿液),然后將乙醚溶液于水浴上蒸去乙醚 ,殘?jiān)儆靡掖既芙夂?,供試?yàn)用,以免干擾。
②試驗(yàn)4的反應(yīng)僅對游離的去氧糖和結(jié)合的甙呈正反應(yīng)。但當(dāng)α去氧糖與葡萄糖等其他糖結(jié)合的多,如不水解則為負(fù)反應(yīng)。
③上述鑒別反應(yīng)均呈陽性,可判斷為強(qiáng)心甙。
8.內(nèi)酯、香豆精及其甙類:取檢品的乙醇溶液10m1,加5%鹽酸溶液10,在沸水浴 中熱15-20分鐘,冷后,加苯提取將苯提取液于水浴上蒸干(避火),殘?jiān)舆m量乙醇溶解后,供做下列檢查:
(1)異羥肟酸鐵試驗(yàn):取上檢液2ml,加鹽酸羥試液2滴,10%氫氧化鉀的甲醇溶液2滴,在水浴上微熱,冷卻,用稀鹽酸酸化,加入15三氯化鐵試劑液1-2滴,顯紫色苛橙紅色。
內(nèi)酯及香豆素類在堿性條件下,與羥反應(yīng)生成異羥肟酸,與鐵鹽絡(luò)合而顯色。
(2)內(nèi)酯試驗(yàn):取上檢液2ml,加1%氫氯化鈉溶液2m1,在沸水浴中加熱3-5分鐘,如溶液較前澄明,加酸酸化后又變混濁為正反應(yīng)。
內(nèi)酯化合物在熱堿溶液中,開環(huán)成鹽而溶于水,酸化則重新閉環(huán),而出內(nèi)酯化合物,溶液即變混濁。
(3)重氮化反應(yīng):取上檢液1ml,加等體積3%碳酸鈉溶液,在沸水浴中加熱3-4分鐘,冷后,加入新配制的重氮化試劑1-2滴,即顯紅色。
(4)熒光反應(yīng):取上檢液點(diǎn)于濾紙上(干后,再點(diǎn)1次,以集中濃度),在紫外光燈下觀察,如為羥基香豆精應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色熒光,熏氨蒸氣后變?yōu)辄S綠色熒光。呋喃香豆精應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色或黃棕色的熒光。
9.樹脂類 取檢品的乙醇溶液1ml,加1-2%氫氧化鈉溶液2-3ml,顯渾濁或沉淀,在水浴上加3-5分鐘,溶液變清或沉淀減少,加酸酸化則又渾濁或沉淀,示含有酸性樹脂。如在上項(xiàng)反太中,當(dāng)加堿加熱后,溶液仍渾濁示含有中性樹脂。
因酸性樹脂能溶于堿液中,加熱后就成澄明液。中性樹脂則不溶于堿性溶液中,故溶液仍顯渾濁。
10.生物堿 取檢品的酸性乙醇溶液20ml,調(diào)節(jié)pH值至6-7,蒸發(fā)除去乙醇,殘?jiān)?%鹽酸溶液4-5ml溶解,濾過,濾液供下列檢查:
(1)碘化鉍鉀試液1ml,加碘化鉍鉀試液1-2滴,生成黃色或橘紅色沉淀。
AIK+BiI3.KI→AIK.BiI3.KI↓
(生物堿)(碘化鉍鉀) (桔紅色)
(2)碘化汞試驗(yàn):取濾液1ml加碘化汞鉀試液1-2滴,生成白色淡黃色沉淀物。
AIK+KI.HgI2→AIK.KI.HgI2↓
若在過量的試劑中其沉淀又復(fù)溶解。
(3)碘一碘化鉀試驗(yàn):取濾液ml,加碘化一碘化鉀試液1-2滴,出現(xiàn)棕色沉淀或混濁。
(4)硅鎢酸試驗(yàn):取濾液1m1,加硅鎢酸試液1-2滴,生成灰白色或淡黃色沉淀。加熱可使反應(yīng)靈敏。
(5)生物堿呈色反應(yīng):
生物堿名稱 |
呈色反應(yīng) |
生物堿名稱 |
呈色反應(yīng) |
||
甲醛硫酸試液 |
鉬酸銨一硫酸試液 |
||||
紫→深紫 紫堇→藍(lán) 紫藍(lán)→藍(lán) 紫堇→藍(lán) 深紅→棕 紅橙 |
紫→棕綠 紫堇→綠 綠→藍(lán) 綠→藍(lán) 紫堇→綠 紅紫 |
紫堇→橙 橙 橙 茶 一 紫→褐 |
綠 一 一 一 黃 綠→紅黃 |
11.有機(jī)酸
(1)溴酚藍(lán)試驗(yàn):取檢品的酸性乙醇溶液點(diǎn)于濾紙,干后,噴霧0.1%溴酚藍(lán)乙醇溶液(70%乙醇),立即在藍(lán)色背景中顯黃色斑點(diǎn)。如不明顯,可噴霧氨水,然后暴露在鹽酸氣體中,背景逐漸由藍(lán)色變?yōu)辄S色,而有機(jī)酸的斑點(diǎn)仍然為藍(lán)色。
(2)酸堿度試驗(yàn):取檢品液(水提取液)以pH試紙檢查,如試紙顏色指示pH在7以下,可能含有有機(jī)酸。
(3)紙層析檢出試驗(yàn):見紙層析操作方法。
①支持劑:新華濾紙(中速)
②展開劑:正丁醇:醋酸:水(4:1:5)。
③顯色劑:0.15溴酚藍(lán)乙醇溶液(70%乙醇)。
結(jié)果:呈現(xiàn)藍(lán)色斑點(diǎn)。
12.揮發(fā)漬及油脂
(1)取檢品的乙醚溶液,置蒸發(fā)皿中,待溶劑揮發(fā)生,殘?jiān)鼮橛蜖钗?,并有香氣或特異自氣,加熱,油狀物減少或消失示含揮發(fā)油。如無香氣,或加狀物不減少,可能為油脂,可于殘?jiān)屑尤肷僭S無水硫酸鈉顆粒,直火加熱,如產(chǎn)生氣泡,并有剌激性特臭的濃白色氣體(丙烯醛),示含油脂類化合物。
(2)取檢品的乙醚溶液,點(diǎn)在濾紙上,待溶劑揮發(fā)生,噴霧0.05%熒光素鈉溶液,再將濾紙下置碘蒸氣上,熏幾分鐘,產(chǎn)生黃或黃綠色斑點(diǎn),背景為粉紅色示含揮發(fā)油。
(3)取檢品的乙醇溶液,置白瓷皿中,待溶劑揮發(fā)生,殘?jiān)屑?%香草醛鹽酸液,顯黃色、紅、棕、藍(lán)、紫等顏色,示含揮發(fā)油。
(4)揮發(fā)油薄層微量檢出反應(yīng):
①吸附劑:硅膠G(濕法制板);中性氧化鋁:石膏:水(5:1:7)。
②展開劑:正已烷:乙酸乙酯(85:15);石油醚:乙酸乙酯(85:15)。
③顯色劑:含5%香草醛的濃硫酸液(臨用新配)1050烘2-10分鐘;熒光照射;濃硫酸。
甾體類、三萜類 | 熱原檢查法 |
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