噬粒
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噬粒(phagemid或phasmid)是由質(zhì)粒載體和單鏈?zhǔn)删w載體構(gòu)建成的。它們既有質(zhì)粒的復(fù)制起點(diǎn)，又有噬菌體的復(fù)制起點(diǎn)。因此，在大腸桿菌細(xì)胞里，可以按正常的雙鏈質(zhì)粒分子進(jìn)行復(fù)制，生成雙鏈DNA；當(dāng)存在輔助噬菌體的條件時，在噬菌體基因Ⅱ蛋白質(zhì)的作用下，又可像單鏈?zhǔn)删wM13一樣按滾環(huán)模型復(fù)制出單鏈DNA，并在包裝成噬菌體顆粒后釋放出宿主細(xì)胞。最為常用的噬粒載體有pUC118和pUCll9。兩者除了多克隆位點(diǎn)的序列正好相反外，其余的序列都是相同的，它們可在宿主細(xì)菌內(nèi)像質(zhì)粒一樣地復(fù)制。當(dāng)宿主細(xì)胞受到輔助噬菌體感染后，噬菌體載體便按單鏈?zhǔn)删w的方式進(jìn)行復(fù)制，然后由輔助噬菌體提供的外殼蛋白包裝成噬菌體顆粒。輔助噬菌體是一類自身DNA復(fù)制效率極低的突變型，但可為宿主細(xì)胞的質(zhì)粒DNA提供的復(fù)制和包裝所需的蛋白酶和外殼蛋白。
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