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醫(yī)學(xué)免疫學(xué)/造血干細(xì)胞的特性

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一、造血干細(xì)胞的起源

造血干細(xì)胞(hemopoietic stem cell,HSC)是存在于造血組織中的一群原始造血細(xì)胞,它不是組織固定細(xì)胞,可存在于造血組織及血液中。造血干細(xì)胞在人胚胎2周時可出現(xiàn)于卵黃囊,第4周開始轉(zhuǎn)移至胚肝,妊娠5個月后,骨髓開始造血,出生后骨髓成為干細(xì)胞的主要來源。在造血組織中,所占比例甚少,如在小鼠骨髓中105核細(xì)胞中的有10個,在脾中105有核細(xì)胞中只有0.2個。

二、造血干細(xì)胞的形態(tài)

干細(xì)胞是一種嗜堿性獨核細(xì)胞,其大小約為8μm,呈圓形,胞核為圓形或腎形,胞核較大,具有2個核仁,染色質(zhì)細(xì)質(zhì)而分散,胞漿呈淺藍(lán)色不帶顆粒,在形態(tài)上與小淋巴細(xì)胞極其相似,但淋巴細(xì)胞體積較小,染色質(zhì)濃染,核仁不明顯且有細(xì)胞器。因此很難用形態(tài)學(xué)識別干細(xì)胞,并與其它獨核細(xì)胞相區(qū)別。

造血干細(xì)胞可包括三級分化水平,即多能干細(xì)胞(pleuripotent stem cell),定向干細(xì)胞(Committed stem cell)及其成熟的子代細(xì)胞。

關(guān)于對造血干細(xì)胞的功能分析,長期以來僅限于對小鼠干細(xì)胞的研究,而對人干細(xì)胞的存在只是來自間接證據(jù),因為不能在人體內(nèi)進(jìn)行如鼠體內(nèi)的功能分析法。70年代以來,由于建立了新的體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),大大促進(jìn)了對人干細(xì)胞的直接研究。

三、造血干細(xì)胞的表面標(biāo)志

由于造血組織中造血干細(xì)胞在形態(tài)學(xué)方面無法與其它單核細(xì)胞區(qū)別,而且數(shù)量極少,這為造血干細(xì)胞的分離純化并對其功能分析和分化的研究造成極大困難。

近年來由于單克隆抗體技術(shù)的進(jìn)步,流式細(xì)胞儀(FACS)的應(yīng)用,以及對小鼠和人造血干細(xì)胞表面標(biāo)志的研究,取得了很大進(jìn)展,為造血細(xì)胞的分離純化及鑒定創(chuàng)造了條件。

1.Thy-1與絲裂原(wheat germ agglutinin,WGA)Visseer等發(fā)現(xiàn)小鼠骨髓中造血干細(xì)胞對WGA有高親和性。利用這一特性,應(yīng)用FACS自骨髓中分離造血干細(xì)胞應(yīng)及核系Mac-1等譜系抗原與WGA反應(yīng)性相結(jié)合,即可自骨髓中Lin-/WGA+細(xì)胞群中分離造血干細(xì)胞,也獲得良好結(jié)果。

也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)正常小鼠骨髓細(xì)胞中,也能表達(dá)低密度Thy-1抗原(Thy-11。)。如與上述標(biāo)志組合,即自骨髓Thy-11。Lin-,WGA+細(xì)胞群中,分離造血干細(xì)胞,可用于對造血細(xì)胞的功能分析。

2.干細(xì)胞抗原(stemcellantigen-1,Sca-1) 有學(xué)者制備一種抗原前T細(xì)胞雜交瘤的單克隆抗體,用這種單抗檢出的抗原分子稱為干細(xì)胞抗原-1(Sca-1)。其后有人自骨髓中Thy-1Io、Lin-、Sca-1+細(xì)胞群中,可分離純?nèi)嗽煅杉?xì)胞。

3.原癌基因(c-kit) 最近證明造血干細(xì)胞與c-kit基因密切相關(guān)。C-kit可編碼一種穿膜酪氨酸激酶受體分子。應(yīng)用單克隆抗體證明此分子可存在于造血干細(xì)胞膜上,其后證明它的配體分子是造血干細(xì)胞因子(stem cell factor,SCF)。它是信號傳導(dǎo)分子,對造血干細(xì)胞的分化具有重要作用。目前,小鼠多能干細(xì)胞表面分子標(biāo)志可視為Thy-1Io、WGA+、c-kit+、Lin-。

c-kit分子可高頻率表達(dá)于多能干細(xì)胞表面,但骨髓中c-kit+細(xì)胞可分化為各種血細(xì)胞,而胸腺中c-kit細(xì)胞可分化為淋巴細(xì)胞,不能分化為髓系細(xì)胞,所以胸腺內(nèi)c-kit+細(xì)胞,可能是淋巴樣干細(xì)胞(表7-1)。

表7-1 胸腺及骨髓中c-kit+細(xì)胞分化機制

胸腺c-kit 骨髓c-kit
粒細(xì)胞 +
單核細(xì)胞系 +
紅細(xì)胞系 +
T細(xì)胞 + +
B細(xì)胞 + +

4.CD34 對人體造血干細(xì)胞表面標(biāo)志的研究,是用單克隆抗體CD34證明的。CD34單克隆抗體檢測的抗原即為CD34分子。自人骨髓細(xì)胞中應(yīng)用FACS可分離純化CD34+細(xì)胞群,如與造血因子共同體外培養(yǎng)可獲得含有各種血細(xì)胞的混合集落,所以CD34+細(xì)胞為骨髓中造血干細(xì)胞,CD34抗原可視為骨髓造血細(xì)胞標(biāo)志之一。

32 免疫細(xì)胞(一):造血干細(xì)胞 | 造血干細(xì)胞的分化 32
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